小鼠体内+类器官双模型，揭示为何病毒感染后肺修复反成阻碍

这项研究聚焦于探索KRT5+细胞如何调控CD4+/CD8+效应T细胞，以及这些T细胞在肺泡再生中的作用。作者发现，异常修复的KRT5+细胞通过CXCR3和Integrin α4β7招募CD4+/CD8+效应T细胞并促进其驻留，效应T细胞通过分泌IFNγ抑制club细胞向AT2细胞的分化，清除CD4+/CD8+T细胞或中和IFNγ，阻断CXCR3或Integrin α4β7，均能促进AT2细胞再生及肺功能修复。

作者观察到发生异常修复时肺部出现大量的组织驻留CD4+/CD8+ T细胞，并与KRT5+基底样细胞呈现时空共定位，随即使用Bio X Cell抗体进行体内清除来评估这些T细胞的功能。

结果清除任一种T细胞，都显著加快小鼠体重恢复，提高血氧饱和度，减轻肺纤维化。而在细胞层面，体内清除CD4+或CD8+ T细胞后，谱系示踪技术观察到Scgb1a1（标记所有club细胞）来源的AT2细胞持续地显著增加。这些结果表明CD4+/CD8+ T细胞在病毒清除后持续驻留，并抑制club细胞向AT2细胞分化，及肺功能恢复。

Bio X Cell抗体使用：

从流感感染7 天后（避免影响病毒清除）开始，小鼠每三天腹腔注射500μg CD4抗体（#BE0003-1，克隆GK1.5） 或CD8α抗体（#BE0004-1，克隆53-6.7），同型对照组分别注射#BE0090（克隆LTF-2）或#BE0089（克隆2A3），流式分析验证清除效果，感染后第14天和21天分析。

为排除体内复杂环境的干扰，作者建立了 3D 上皮类器官与 T 细胞的体外共培养模型，以检测细胞水平的直接互作，并鉴定其中的关键作用分子。在这一体外活细胞模型中，Bio X Cell 抗体同样表现出卓越的性能。

作者发现CD4+/CD8+ T细胞在体外模型中倾向于直接黏附气道类器官而非肺泡类器官，并且病毒感染后趋化因子Cxcl10/11及其受体Cxcr3的基因表达上调。随后在共培养模型中使用Bio X Cell抗体阻断CXCR3验证其作用。结果CXCR3抗体处理显著降低CD4+/CD8+ T细胞对气道类器官的黏附能力，证实T细胞招募依赖于CXCL10/11-CXCR3轴的趋化作用。

而且CD4+/CD8+ T细胞在共培养中强效抑制club细胞形成肺泡类器官，而加入Bio X Cell抗体中和IFNγ后，这种抑制完全被逆转，中和TNFα则无效，表明T细胞通过分泌IFNγ抑制肺泡再生。

Bio X Cell抗体使用：

培养基中加入CXCR3抗体（#BE0249，克隆CXCR3-173）、IFNγ抗体（#BE0055，克隆XMG1.2）、TNFα抗体（#BE0058，克隆XT3.11）及同型对照，均为50μg/mL，每三天更换一次培养基，第10天收获类器官进行分析。

明确了机制后，作者尝试通过阻断T细胞的招募和驻留来治疗。

IFNγ中和抗体治疗改善了肺功能，使损伤区域的SFTPC+细胞获得与T细胞清除相当的增加，并显著降低趋化因子表达及组织驻留T细胞的数量。而使用抗体在小鼠体内阻断CXCR3或Integrin α4β7均显著减少肺驻留 T 细胞，改善小鼠的血氧饱和度，降低肺纤维化。

这些结果再次确认这些分子在KRT5⁺细胞阻碍肺泡再生中的关键作用，并为治疗严重感染导致的肺损伤提供可行的转化方案。

Bio X Cell抗体使用：

从流感感染7 天后开始，小鼠每三天腹腔注射500μg IFNγ抗体（#BE0055，克隆XMG1.2），250μg CXCR3抗体（#BE0249，克隆CXCR3-173）或400μg Integrin α4β7抗体（#BE0034，克隆DAKTK32），并设置同型对照组，感染后第14天和21天分析。

这项研究通过在小鼠体内模型和3D类器官-免疫共培养体外模型之间的反复验证，极大地增强了研究结论的可靠性，也为后续开发病毒感染后肺纤维化、长新冠等后遗症的药物提供了多个明确的候选靶点。

而Bio X Cell高品质的InVivoMAb系列功能抗体，凭借其高纯度、低内毒素和无防腐剂的优势，尤其适合于小鼠体内和3D类器官等各类活体、活细胞的长时程实验，在不同模型间为数据连贯性和结论可靠性保驾护航。

参考文献