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如何检测细胞衰老?

216 人阅读发布时间:2024-12-10 14:34

正常原代细胞在培养过程中只能增殖有限数量的细胞群倍,之后就会出现生长停滞和衰老表型。细胞衰老是一种稳定的细胞周期停滞状态,衰老细胞的特点是不可逆的G1生长抑制,涉及抑制驱动细胞周期进程的基因以及细胞周期抑制因子(如p16INK4a、p53及其转录靶点p21CIP1)的上调。它们对有丝分裂诱导的增殖具有抵抗力,并且形态上细胞也会呈现异常增大和扁平状。细胞衰老可以通过检测衰老细胞的标志物来检测,如酸性衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)。

 

Cell Biolabs提供3种检测SA-β-Gal的试剂盒,为细胞衰老相关研究助力。

● 96-Well Cellular Senescence Assay Kit (SA-β-Gal Activity, Fluorometric Format)

货号

CBA-231、CBA-231-5

规格

120 assays、5 x 120 assays

检测

荧光酶标仪

组成

2 x Cell Lysis Buffer

2 x Reaction Buffer

SA-β-Gal Substrate (20x)

Stop Solution

该试剂盒通过荧光底物测量SA-β-Gal的活性,提供了一种易于使用和高效的方法来确定细胞衰老。具体产品信息详见官网说明书。

 

● Quantitative Cellular Senescence Assay Kit (SA-β-Gal, Fluorometric)

货号

CBA-232、CBA-232-5

规格

10 assays (35 mm dishes)、5 x 10 assays (35 mm dishes)

检测

荧光显微镜/流式细胞术

组成

Cell Pretreatment Solution (1000x)

SA-β-Gal Substrate (200x)

该定量检测试剂盒使用荧光底物来测量SA-β-Gal活性。这种化合物是β-半乳糖苷酶的一种膜渗透性非荧光底物,它在半乳糖残基水解后会发出绿色荧光,并保留在细胞内。与使用X-gal 的传统细胞化学测定相比,使用荧光底物大大提高了测定的灵敏度。此外,无毒的荧光底物还可以通过流式细胞仪研究活细胞,对SA-β-Gal活性进行定量。每个试剂盒可在35 mm培养皿中进行多达10个assay。具体产品信息详见官网说明书。

 

● Cellular Senescence Assay Kit (SA-β-Gal Staining)

货号

CBA-230、CBA-230-5

规格

50 assays、5 x 50 assays

检测

光学显微镜

组成

100x Fixing Solution

Staining Solution A

Staining Solution B

Staining Solution C

Staining Solution D

X-gal Solution

该试剂盒利用SA-β-Gal催化X-gal的水解,在衰老细胞中 产生蓝色,将结果可视化。每个试剂盒都提供足量的试剂,可在35mm的培养皿中进行50个assay。具体产品信息详见官网说明书。

 

 

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