凝集素应用手册 ( 血管灌注 )

某些凝集素可与血管内皮细胞上的糖链特异性结合，因而常被用于血管的标记和可视化观察。虽然可以用这些凝集素直接对组织切片进行染色，但也可以通过静脉注射带有标记的凝集素，这样可以优先对内皮细胞进行染色，并观察凝集素在血管中的渗漏情况，该操作可以在活体动物或离体组织上进行。番茄凝集素（Lycopersicon esculentum (Tomato) lectin，LEL）对不同小鼠组织的染色就是一个优秀案例，具体可参阅Robertson 等人的研究报告(Ref.89)。由于不同物种内皮细胞上的糖链存在差异，建议针对您感兴趣的物种选择合适的凝集素（如番茄凝集素常用于啮齿类动物），以获得最佳染色信号。有关用于血管成像的不同试剂的更多信息，请参阅 Lokmic 和 Mitchell的研究报告 (Ref.90)。

 

异常的血管形态是肿瘤的特征之一，也是对整个肿瘤提供分子或细胞治疗的障碍（Ref.91)。Park等人设计了一种通过抗体递送药物使肿瘤血管系统正常化的治疗策略。他们通过在神经胶质瘤小鼠模型中，将LEL进行血管灌注后进行染色，证明了药物对肿瘤血管生成的调节作用（Ref.29）。

 

 精选文献 

• Imaging host vascularization of engrafted tissues (Ref. 5)

• Analysis of vascular permeability and visualization of microvessels (Ref. 23)

• Quantifying tissue vascularization for tissue engineering (Ref. 33)

• Detection and quantification of tumor angiogenesis (Ref. 21)

• Determination of drug delivery on vascular organization (Ref. 29)

• Vascular endothelial staining standard for methodology comparison (Ref. 27)

 

 实验流程概览 

制备凝集素溶液

• 使用无菌PBS将凝集素溶解或稀释至0.5-2ug/ml；

• 注射前，将试剂平衡至室温。

注射

• 使用适当的方法约束动物，为注射做准备；

• 观察并准备注射部位，即尾侧静脉；

• 静脉注射凝集素溶液(100-200ul)；

• 轻轻按压以封闭注射部位。

处死*

• 注射后15-30分钟处死动物。

样本制备、成像

• 收集所需的组织进行分析和处理，以便后续图片捕获；

• 通过所需技术捕获图像。

*所有动物处理方法和技术都必须遵守 IACUC((Institutional Animal Care and Use Committee)) 的指导方针，并符合实验动物机构批准的方案。

 

 

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