如何避免类风湿因子和嗜异性抗体影响您的ELISA结果

什么是类风湿因子（rheumatoid factor）？

RF(类风湿因子) 是许多不同抗体的可变混合物；这些抗体中有些结合其他抗体，有些是自身抗体 (结合自身抗原的抗体)。

 

什么是嗜异性抗体？（heterophilic antibodies）

嗜异性抗体可以结合其他抗体。在人类样本中，这些抗体或者是结合人类免疫球蛋白的自身抗体，或者是人类抗动物免疫球蛋白抗体 (HAIA)，包括人类抗小鼠抗体 (HAMA)。

 

类风湿因子和嗜异性抗体如何使 ELISA 结果不准确？

在夹心法 ELISA 中，匹配的抗体对用于捕获和检测可溶性分析物。当样品中存在分析物时，正常情况可以测量到阳性信号 (如图 1A 所示)。然而，血清和血浆中的干扰因素，如类风湿因子 (RF) 和嗜异性抗体，会使检测的 capture 和 detection 抗体交联，从而导致假阳性信号和不准确的分析物定量 (如图 1B 所示)。交联使得无法区分特异性和非特异性信号，最终导致结果不可靠。如果要消除干扰，通常需要加入额外的样品预处理步骤，例如通过 PEG 6000 沉淀或免疫球蛋白阻断去除抗体。

 

 

为了有效消除类风湿因子和嗜异性抗体所造成的假阳性信号，提高分析结果的可信度，Mabtech 推出 ELISA PathRF kits，在这种 ELISA 形式中，detection 抗体采用重组的单克隆抗体，并加入专门的 RF-block diluent，避免了干扰的风险。(如图 1C 所示)

 

Mabtech 的 ELISA PathRF 试剂盒已通过含 RF 血浆的验证

使用一组不匹配的抗体来确定 ELISA 中获得的信号是真信号还是假阳性信号。这样一组不匹配的抗体由与完全不同的蛋白质结合的 capture 和 detection 抗体组成。这种不匹配的设置不能产生真实的信号。然而，如果获得了信号，这表明样品中的 RF 因子交联了 capture 和 detection 抗体，产生了假阳性信号。

 

在来自类风湿性关节炎患者的 100 份血浆样品中，Mabtech 使用不匹配的 ELISA 抗体组观察到高频率的假阳性结果。相比之下，ELISA PathRF 没有产生假阳性信号 (图 2)。

图 2. Rheumatoid arthritis 患者 (n = 100) 的血浆在不匹配的 ELISA(针对不同靶标的不匹配抗体组) 或不匹配的 ELISA PathRF 中进行测量。

 

订购详情

货号	名称	规格	检测范围
3420 - 1 HP-DP- 1	ELISA PathRF: Human IFN-γ	1 plate	1 - 1000 pg/ml
3416 - 1 HP-DP- 1	ELISA PathRF: Human IL- 1β	1 plate	1 - 316 pg/ml
3460 - 1 HP-DP- 1	ELISA PathRF: Human IL- 6	1 plate	10 - 3160 pg/ml
3560 - 1 HP-DP- 1	ELISA PathRF: Human IL- 8	1 plate	3.16 - 1000 pg/ml
3430 - 1 HP-DP- 1	ELISA PathRF: Human IL- 10	1 plate	3.16 - 1000 pg/ml
3520 - 1 HP-DP- 1	ELISA PathRF: Human IL- 17A	1 plate	3.16 - 1000 pg/ml
3512 - 1 HP-DP- 1	ELISA PathRF: Human TNF-α	1 plate	3.16 - 1000 pg/ml

 

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