核酸转染增强剂——NATE™，InvivoGen产品

产品介绍：

NATE™是InvivoGen设计的一种核酸转染增强剂，可以提高难转染细胞的瞬转与稳转效率，尤其适合人的单核细胞与小鼠巨噬细胞等难转染的细胞，如外周血单核细胞（THP-1）和小鼠单核巨噬细胞白血病细胞（RAW 264.7），且只需在平时加转染试剂操作前30min加入NATE™即可。值得注意的是，NATE对细胞温和，不会对细胞培养产生任何进一步的毒性。

 

在真核细胞转染过程中，外源性核酸(如质粒)的主要障碍是会被胞质传感器检测，如cGAS/STING、AIM2炎性小体和LC3介导的自噬。这些防御信号级联的激活常常会降低转染率和细胞存活率，特别是在难以转染的细胞(如免疫细胞)中会更明显。当使用NATE™时，这些核酸传感通路将被抑制，从而在转染过程中保护质粒并促进其表达。

 

 

 

产品特色：

与常用转染试剂 (e.g. GeneXPlus, Lipofectamine® LTX, and jetPRIME®) 及物理方法兼容。

更高的转染率，也适用于大质粒 (> 10kb)。

在所有的转染测试方案中都显示对细胞温和，没有毒性。

 

产品信息：

Product Name	Unit Size	Cat. code
NATE™	1 mL (100 reactions)	lyec-nate

 

应用举例

 

利用GeneXPlus将GFP标记的质粒(3kb)瞬时转染到THP-1细胞中，48小时后，荧光显微镜下观察，使用NATE™后转染效率明显增加。

 

 

利用GeneXPlus、Lipofectamine LTX、jetPRIME、nucleofection等常用转染方法，将~3kb质粒(左)和~8kb质粒(右)瞬时转染至THP-1细胞。48小时后，用流式细胞术检测转染效率，与不使用NATE™转染相比，数据有明显差异变化。

 

详细说明

 

 

在真核细胞转染过程中，“外来”核酸(如质粒DNA)的主要障碍是它们自身被胞质核酸传感器检测到，如黑色素瘤缺乏因子2 (AIM2)和环GMP-AMP合成酶(cGAS)介导的自噬。

 

AIM2是一种细胞质传感器，与双链DNA (dsDNA)结合后，会形成一种称为炎性小体的蛋白质复合物。最终，促炎症细胞因子IL-1β和IL-18的成熟需要通过相应的AIM2 炎症小体的形成和半胱天冬氨酸蛋白水解酶1（caspase-1）的活化来完成。这些细胞因子的产生不利于转染成功。

 

cGAS能识别dsDNA，并通过STING/TBK1/IRF3信号轴诱导I型干扰素(IFNs)的产生，以及一些干扰素刺激基因(ISGs)的表达，这些强大的效应功能，在转染中是非常多余的。

此外，STING的激活不依赖于TBK1-和INF，就可以导致LC3相关的自噬。最终，自噬体将形成包含“外来”核酸(如质粒)的形式，并与溶酶体融合在细胞中降解。

 

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