甲基化DNA富集试剂盒

840 人阅读发布时间：2014-04-24 15:06

Active Motif公司的MethylCollector™ Ultra试剂盒基于磁珠法，可用于从基因组DNA片段中快速分离CpG甲基化DNA。该试剂盒基于Methylated CpG Island Recovery Assay (MIRA，美国专利号7,425,415)的原理，使用甲基化特异性结合蛋白复合物MBD2b/MBD3L1富集甲基化CpG二核苷。富集的DNA可用于多种下游的应用，比如终点PCR（end point PCR）或实时定量PCR(real time PCR)分析正常或者疾病样本中特定位点的甲基化情况、重亚硫酸盐处理后的克隆和测序或扩增和标记后用于微阵列分析。

MethylCollector^TM Ultra试剂盒的优势
● 与其他的MBD蛋白或基于抗体捕获的方法（如MeDIP）相比，该试剂盒提供的甲基化特异性结合蛋白复合物MBD2b/MBD3L1具有更强的富集效果
● 简单，快速，磁珠方法使实验操作时间少于3小时
● 出色的表现，仅需要较少的input DNA(1ng - 1 µg)
● 试剂盒含有阳性对照DNA（Mse I 酶切处理的男性基因组DNA，20ng/ul)和PCR引物(GAPDH PCR引物,Xist PCR引物和NBR2 PCR引物)
● 直接获得纯化DNA，无需其他纯化步骤，保证DNA样品回收率，洗脱的DNA适用于多种下游应用。

Methylated CpG Island Recovery Assay (MIRA)

MethylCollector™ Ultra试剂盒基于Methylated CpG Island Recovery Assay (MIRA)的原理，利用含His标签的甲基结合蛋白复合物MBD2b/MBD3L1特异性结合经过超声法或者酶切法制备的CpG甲基化DNA片段。Nickel包被的磁珠捕获蛋白-DNA复合物，使用磁力架富集该复合物。优化的试剂确保清除未甲基化的片段。使用含蛋白酶K的洗脱液将甲基化DNA片段从磁珠上洗脱下来，洗脱的DNA可用于PCR等下游分析。

图1 MethylCollector™ Ultra的操作流程

图2 MethylCollector™富集甲基化CpG的能力高于其他的方法

使用MethylCollector™ Ultra 试剂盒、竞争品牌MM的试剂盒和MeDIP（使用抗5-甲基胞嘧啶抗体沉淀甲基化DNA）方法分别从100ng Mse I 酶切处理的男性基因组DNA中富集甲基化DNA，实时定量PCR分析富集的DNA。洗脱的DNA分别用甲基化PCR引物SNRPN （红色）和非甲基化PCR引物FOXD2（蓝色）进行PCR扩增分析。结果表明，使用MethylCollector™ Ultra富集的甲基化DNA的扩增循环数远远早于非甲基DNA。

产品信息

产品编号	产品名称	规格	供应商
55005	MethylCollector™ Ultra	30 rxns	Active Motif

详细信息请联系欣博盛生物，全国服务热线4006-800-892

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